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生药鉴定的方法有哪些?
生药鉴定就是依据国家药典,部颁和地方药品标准以及有关资料规定或记载的生药标准,对商品生药或检品进行真实性、纯度、品质优良度的检定。
生药真实性鉴定,包括原植(动)物鉴定、性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定及生物检定等项。生药纯度检定是检查样品中有无杂质及其数量是否超过规定的限度。杂质包括生药原植(动)物的非药用部分、有机杂质和无机杂质。无机杂质的检查一般采用过筛及灰分、酸不溶性灰分定量等方法来测定。生药品质优良度检定是包括水分、浸出物、有效成分含量的测定,以确定检品的质量是否合乎规定的要求。
中国药典附录部分收载的药材取样法,药材检定通则,药材及成方制剂显微鉴别法,药材炮制通则,杂质检查法,水分测定法,灰分测定法,浸出物测定法,挥发油测定法,色谱法(层析法)等,都是生药鉴定方法的依据,现将部分常规操作方法介绍如下:
一、生药的取样
生药的取样是指选取供检定用生药样品的方法。取样的代表性直接影响到检定结果的正确性。因此,必须重视取样的各个环节。
1.
取样前,应注意品名、产地、规格等级及包件式样是否一致,检查包装的完整性、清洁程度以及有无水迹、霉变或其他物质污染等,详细记录。凡有异常情况的包件,应单独检验。
2.
从同批生药包件中抽取检定用样品原则如下:生药总包件数在100件以下的
......
【生药学】 性状鉴别的要点是什么
性状鉴别是对药材的形、色、气味、大小、质地、断面等特征、简单理化反应,直接观察药材,作出符合客观实际的结论,区分药材真、伪、优、劣的方法。
1、形状
药材的外形特征,一般较为固定。如园柱形(黄芪、甘草)、纺缍形(麦冬、百部)、鸡爪形(黄连)拳形(川芎)、团块状(泽泻,生地)等。—些品种,老药师能使用形象的语言来表达药材外形特征:如
海马:马头、蛇尾、瓦楞身。
野山参:马牙芦(芦碗紧密排列、边缘齐棱如马牙)、灯草芯、枣核 (不定根生于芦头上,中部较粗,多下垂,形如枣核),铁线纹、落肩膀、细结皮(紧皮细横纹)、少数腿(人字腿)、珍珠须(尾上小疙瘩——珍珠点,疙瘩须)。
蕲蛇:龙头虎口(翘鼻头)、方胜纹(灰黄或灰白菱方形斑纹)、连珠斑(黑色园斑,位于腹面两侧)、佛指甲(尾尖端为三角形鳞片包裹)。
防风:蚯蚓头(根头部具有密集的环纹)。
川贝:怀中抱月(内外层鳞片,大小悬殊,小鳞片被紧包在心脏形的大鳞片内,只留一新月形的部分在外,称怀中抱月)。
其它如马兜铃状如马脖上下垂的铃铛;马鞭草穗状花序细长,形如马鞭;木鳖子扁平园板状如鳖;瓦楞子如房上瓦片排列之楞状;佛手果实具手状;冬虫夏草体似幼蚕,头部子座细长呈圆柱形。所观察药材应是完整之品。
2、大小
药材的大小(指长短、粗细、厚薄),一般有一定的幅度。如测量大小与规定有差异时,应测量较多的样品,可允许有少量高于或低于规定的数值。必须选择有代表性和数的常见药材进行测量,大的用cm(厘米),细小的用mm(毫米)表示。一般习惯测量时根茎、果实称长x直径;鳞茎称高x直径;皮作长、宽、厚;种子作长、宽或直径。大小的测量,主要用于特殊商品的分等、分级。
3、色泽
指药材表面的颜色和光亮度。商品药材的色泽一般较固定,色泽的变化与药材的质量关系很大,可反映出药材的真伪和质量的好坏,药材品种不同,加工条件变化、贮存时间长短或加工不当,可改变药材色泽,表示药材质量降低。观察色泽应在白天自然光线下或日光灯下进行,颜色的描述,以质量好的在前,色淡的在前。其例:红
色:朱砂 鲜红色或暗红色有光泽;红花、红黄或红色;丹参 紫红或棕红、暗红。紫色:紫苏叶 两面紫色或上表面绿色、下表面紫色;紫草 表面紫红色或紫褐色。黑色:黑芝麻 表面黑色;黑胡椒 表面黑褐色;墨旱莲草 表面墨绿色;乌梅 表面乌黑色或黑棕色。黄色:川连 表面灰黄色或黄褐色 皮部橙红色 木部鲜黄色;川黄柏外表黄褐色或黄棕色,内表暗黄色;姜黄 表面深黄色。白色;白芷 断面白色或灰白色;白藓皮 外表灰白色,内表类白色;白芨断面白色或灰白色;山药 表面黄白色,断面白色。褐色:代赭石表面暗棕红色或灰黑色。蓝色:青黛 深蓝色。杂色:五花龙骨 淡灰白色、淡黄白色或淡黄棕色,夹有蓝灰色及红棕色深浅不同的花纹。
石膏有绢丝光泽;自然铜金属光泽;大青盐玻璃样光泽;珍珠彩光闪耀;延胡索蜡样光泽;花蕊石具闪星状亮光;青礞石断面可见闪光星点;金礞石有闪烁的金黄色光泽;雄黄断面具树脂样光泽,晶面金刚石样光泽。
4、表面
药材的外表面或内表面有具体的特征,可供鉴别,如光滑、粗糙、皮孔、皱纹等。如单子叶植物根茎及球茎节上的膜质鳞叶,根痕;蕨类植物的鳞片、毛等,这些特征的有无和程度,常是鉴别药材的主要特征之一。如枇杷叶的毛,苍耳子的刺,黄连的鳞叶,黄柏的栓皮,厚朴的皮孔,乌梅的皱纹纹理,王不留行的雕纹、苏予的网纹,大黄、首乌的星点、锦纹,天麻的鹦哥咀,园脐眼、点状环(蛤蟆皮),白芷具有
突起的皮孔和疙瘩状根痕等。
5、质地
指药材的软硬、坚韧、疏松、轻重、粘性或粉性等特征。常用的术语有:(1)松泡 表示质轻而松,如南沙参(泡参)泡而松;灯芯草、松花粉质轻。(2)粉性 表示含有大量的淀粉,如山药、天花粉。(3)粘性 表示含粘液质,如鲜石斛,折断面显粘性、干品嚼之呈粘性;天门冬柔润具粘性。(4)柔润 表示柔软而润泽,如当归、玉竹。(5)油润 具有油性,如柏子仁等。(6)角质 表示含多量淀粉,因加工糊化,呈半透明,如郁金、天麻等。(7)坚韧 表示质坚韧不易折断,如丝瓜络、桑白皮等。其他如十黄九糠的大黄,糟皮粉茬的丹皮,心枯朽的黄芩等。
6、断面
指药材折断而所具有的特征,如自然折断面、破碎面、横断面等。观察折断时的现象,如有无粉末飞扬、响声、折断的难易等;观察折断面如平坦、粗糙、颗粒性、纤维性、胶丝以及层层剥离等情况。此法主要用于皮类、长条状的根及茎类,藤、枝类药材的鉴别。
用刀横切(或削)成平面,观察皮、本两部的比例、色泽、射线与维管束的排列形式,如菊花心(黄芪)、车轮纹(粉防己),特殊维管束——云纹、星点,散生——维管束、筋脉点及木部小孔(导管)和棕色小点(油室或油细胞)等特征。如九节菖蒲断面白色粉性,可见淡黄小点(维管束)6-9排列成环。大黄断面淡红棕色或黄棕色,根
茎髓部宽广颗粒状,有星点环列或散在,根本部发达,具放射状纹理;天麻断面平坦,黄白色至淡棕色,角质样;延胡索断面黄色角质样;有腊样光泽;木贼断面中空,周围有多数园形小空腔,排列成环;首乌断面红棕色,皮部有4-11个类园形的异形维管束环列。
7、味、从古至今,尝味是中药鉴别的重要手段,药材之味与成分、性质关系很大。例如:淡——石膏、川通草;酸一乌梅、山楂、木瓜;甘一党参、龙眼肉;辛一细辛(麻)、干姜(辣)、半夏、南星(刺激咽喉);咸一戎盐、秋石;苦一龙胆草、鸦胆子、黄连、穿心莲;五味 五味子;涩一五倍子;苦涩一大黄;苦而回甜一牛黄、熊胆;吸舌一龙骨、竹黄;粘性一黄精、玉竹、茯苓;凉一薄荷、冰片;砂砾感一大黄。
尝药注意:取样要有代表性,药材各部味道可能不同,如果实的果皮与种子,树皮的外侧与内侧,根的皮部与木部。样品须口中咀嚼一分钟才能准确尝出(舌之各部味觉有异)。
有强烈刺激性和毒性药材,如草乌、白附子、狼毒、半夏等,尝量要少、吐出、漱口洗手,以免中毒。
8、水试
选用某些药材在水中的比重和特殊变化,作为鉴别特征之一。如番红花用水泡后,水变金黄色,花不退色;苏木投入热水中,呈鲜艳的桃红色透明溶液,加酸(或白醋)则溶液变为黄色,加碱(或石灰水)溶液则变红色;熊胆粉末投入清水杯中,可逐渐溶解而盘旋,有黄线下垂至杯底,且不扩散;蟾酥遇水后呈乳白色。
9、火试
有些藤木类、树脂类和动物类药材用火烧之,能产生特殊的气味、颜色、烟雾、响声等,用以鉴别药材。如降香微有香气,点燃则香气浓烈,燃时有油流出,烧完后留有白灰;血竭放在锅纸上,下面用火烤,溶化后,色鲜红如血而透明,无残渣;麝香少许用火烧时有轻微爆响声,起油点如珠,但无臭气,灰为白色;海金砂易点燃而发爆鸣声及闪光;松花粉及蒲黄无此现象,大青盐置火焰上燃烧,火焰呈亮黄色
(Na+);马勃火焰上轻轻抖动,可见火星飞扬,熄后发生大量白烟;青黛微火灼烧有紫红色烟雾知数发生,均可资鉴别。
10、气
药材具挥发性物质,有特殊的香气或臭气。可将药材弄碎或热水中泡一下闻,以资鉴别。无气味者一珍珠、石膏;微有气味一山药;气香、清香者一大黄、牛黄,熊胆、冰片、芳香一八角茴香;香气浓烈一肉桂、砂仁、麝香;臭一九香虫、紫草、芜荑;特殊气;羊膻气一白癣皮,焦糖气一黄精,腥一紫河车,蒜臭一薤白,苯甲醛臭一丹皮,硫臭一硫,党参臭一桔梗科药材,鸡屎臭一鸡矢藤,樟脑臭一关木通(粗皮摩控)。刺激臭引起打嚏者一蟾酥、猪牙皂。
11、其他
牛黄挂甲,麝香槽针检查有冒槽现象,手捏成团等。
如何辨别中药材的真假、质量的好坏?
中药材的鉴别方法有很多,通常可分为对植物自然形态的鉴别,对炮制药材外表性状的鉴别,用显微镜观察微观结构的鉴别,以及化学分析、生物测定等鉴别方法。其中最主要、也是最常用的,还是中药材的经验鉴别法,也就是对药材的外观性状的鉴别。
以下为您介绍几种简单的经验鉴别方法:
一、看外观,注意观察药材的外表特征,如表皮、颜色、形状、粗细、断面等等。
1、看药材的表面。不同种类的药材由于用药部位的不同,其外形特征会有所差异。如根类药材多为圆柱形或纺锤形,而根茎类药材都有较多的茎痕,皮类药材则多为卷筒状,等等。另外,一些药材有着它们自己特定的表面特征,或光华、或粗糙、或长有鳞叶、皮孔、茸毛和突起等。比如海马的外形就被总结成为“马头蛇尾瓦楞身”,羚羊角长有“通天眼”,防风长有“蚯蚓头”等。这些特征都是鉴别道地药材真伪优劣的重要依据。
2、看颜色。药材颜色的不同或变化,不仅与它的品种和本身的质量有关,不适当的加工和储藏方法也会直接影响药材的色泽,因此颜色是鉴别药材的重要因素。我们可以通过对药材外表颜色的观察,分辨出药材的品种、产地和质量的好坏。比如,黄连色要黄,丹参色要红,玄参色偏黑等。
3、看断面。无论植物也好,动物也好,都是由一层层的组织器官构造而成的,当药材被切开,这一层层的构造就会清晰地展现出来,就像古树的年轮一样。很多药材的断面都具有明显的特征,而这些特征就是药材内部构造的直接体现。我们可以清楚的看见各种分层、纹路和不同形状的小点。比如在防己断面上能看见明显的车轮纹理,而黄芪的折断面纹理呈“菊花心”样,杜仲在折断时更有胶状的细丝相连,等等。这些独有的断面特征是鉴别药材的重要依据。
二、手摸。用手感受药材的软硬、轻重,疏松还是致密,光滑还是粘腻,细致还是粗糙,以此鉴别药材的好坏。不同药材的质感是不一样的,即使是同一种药材,由于加工炮制的方法不同,也会有较大的差异。如荆三棱坚实体重,而泡三棱则体轻;盐附子质软,而黑附子则质地坚硬。
三、口尝和鼻闻。药材的气味与其所含的成分有关,鼻闻是比较重要的鉴别方法,尤其对于鉴别一些有浓郁气味的药材是很有效的,如薄荷的香、鱼腥草的腥、阿魏的臭等等。口尝法鉴别药材的意义不仅在于味道还包括“味感”,味分为辛、甘、酸、苦、咸五味,如山楂的酸、黄连的苦、甘草的甜等。味感则分为麻、涩、淡、滑、凉、腻等。药材的味感和所含的化学物质也有密切关系,在中药材口尝鉴别的实践中,可按药材的品种和质量分类进行判断。
四、水试和火试。有些药材放在水中,或用火烧灼一下会产生特殊的现象。如熊胆的粉末放在水中,会先在水面上旋转,然后成黄线下沉而不会扩散。麝香被烧灼时,会产生浓郁的香气,燃尽后留下白色的灰末。这些特殊的现象都与药材内所含的化学成分有密切的关系,是常用的鉴别方法。
中药材的经验鉴别是非常实用的好方法,但要能正确的鉴别药材的真伪优劣,还需要多年经验的不断积累,需要对中药知识的不断充实,才能认药准确。
生药学的生药质量标准
内容包括原植(动)物的科名、植(动)物的中文名、拉丁学名、药用部位、采收季节和产地加工等。矿物药包括该矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分及产地加工。
原植(动)物需经有关单位鉴定,确定原植(动)物的科名、中文名及拉丁学名,矿物的中文名及拉丁名。药用部位是指植(动、矿)物经产地加工后药用的某一部分或全部。采收季节和产地加工是指保证药材质量的最佳采收季节和产地加工方法。 包括显微鉴别、理化鉴别、色谱或光谱鉴别及其它方法的鉴别。选用方法要求专属、灵敏。
1.显微鉴别
为生药鉴定的重要手段之一,包括组织切片、粉末或表面制片、显微化学反应。
2.理化鉴别
包括呈色反应、沉淀反应、荧光反应等,属功能团的鉴别反应,凡有相同功能团的成分均可能呈阳性反应,因此专属性不强,一般情况下,不宜作为质量标准中最终鉴别项目。
3.色谱鉴别
是利用薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)或高效液相色谱(HPLC)等对生药进行真伪鉴定。具体方法参见第三章相关内容。色谱鉴别应设对照品或对照药材对照。TLC法可以在一块层析板上容纳多个样品及出现多个信息(斑点、色泽、Rf值等),只要一些特征斑点(甚至是未知成分)具再现性,就可以作为确认依据。同时因TLC不需特殊的仪器,操作简便,加之近年来高效吸附剂、商品化的预制板、摄像装置的应用,极大的提高了分离效果、检出灵敏度、准确性和重现性,使TLC法已成为目前应用最多的生药理化鉴别方法。GC法适用于含挥发性成分药材的鉴别。一般结合含量测定进行。HPLC法较少用于鉴别,若含量测定采用了HPLC法或其它方法无法鉴别时,可同时用于鉴别。
4.光谱鉴别
在生药鉴别时,由于多数药材的提取物在270~280nm左右均可能有最大吸收,因而不能构成某一药材的鉴别特征,或特征性不强。所以在一般情况下,光谱直接用于鉴别的不多。如在特定的情况下,在与类似品或掺伪品对比研究的基础上,能构成鉴别特征的,也可应用。
5.指纹图谱
生药指纹图谱系指生药经过适当处理后,采用一定的分析手段,得到能够标示该生药特性的共有峰的图谱。建立生药指纹图谱的目的是为了全面反映生药所含内在化学成分的种类和相对含量,进而反映生药的整体质量。指纹图谱也是国际公认的控制天然产物质量的有效方法。
生药指纹图谱必须同时具有系统性、特征性和重现性。
系统性是指指纹图谱反映的化学成分应包括有效组分群中的主要成分,或指标成分的全部。如大黄的有效成分为蒽醌类化合物,则其指纹谱应尽可能多地反映蒽醌类成分。
特征性是指指纹图谱中反映的化学成分信息(具体表现为保留时间或位移值)是具有高度选择性的,这些信息的综合结果能特征地区分中药的真伪与优劣。
重现性指在规定的方法和条件下,不同的操作者和不同的实验室所建立的指纹图谱的误差应在允许的范围之内。
生药指纹图谱的研究和制订有其具体的内容和技术要求。简述如下:
(1)名称、汉语拼音按中药命名原则制定。
(2)来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁名。
(3)供试品的制备应根据生药中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要,选择适宜的方法进行制备。制备方法必须确保该生药的主要化学成分在指纹图谱中被体现。应说明选用制备方法的依据。如供试品需要提取、纯化,应考察提取溶剂、提取方法、纯化方法等,提取、纯化方法应力求最大限度地保留供试品中的化学成分;如供试品需要粉碎检测,应考察粉碎方法、粒度等。
(4)参照物的制备应说明参照物的选择和试验样品制备的依据。应根据供试品中所含成分的性质,选择适宜的对照品或内标物作为参照物。参照物的制备应根据检测方法的需要,选择适宜的方法进行,并说明制备理由。
(5)检测方法根据供试品的特点和所含化学成分的理化性质选择相应的检测方法。应说明选择检测方法的依据和该检测方法的原理,确定该检测方法的方法学考察资料和相关图谱(包括稳定性、精密度和重现性)。对于含成分类型较多的生药,如一种检测方法或一张图谱不能反映该生药的固有特性,可以考虑采用多种检测方法或一种检测方法的多种测定条件,建立多张指纹图谱。建立指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板等必须固定厂家和型号、规格,试剂、测定条件等也必须相应固定。采用光谱法建立指纹图谱,其相应的检测条件也必须固定。①稳定性试验主要考察供试品的稳定性。取同一供试品,分别在不同时间检测,考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性,确定检测时间。②精密度试验主要考察仪器的精密度。取同一供试品,连续进样5次以上,考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。采用高效液相色谱和气相色谱制定指纹图谱,在指纹图谱中规定共有峰面积比值的各色谱峰,其峰面积比值的相对标准偏差RSD不得大于3%,其它方法不得大于5%。采用光谱方法检测的供试品,参照色谱方法进行相应考察,相对标准偏差RSD不得大于3%。③重现性试验主要考察实验方法的重现性。取同一批号的供试品5份以上,按照供试品的制备和检测方法制备供试品并进行检测,考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。采用高效液相色谱和气相色谱制定指纹图谱,在指纹图谱中规定共有峰面积比值的各色谱峰,其峰面积比值的相对标准偏差RSD不得大于3%,其它方法不得大于5%。采用光谱方法检测的供试品,参照色谱方法进行相应考察,相对标准偏差RSD不得大于3%。
(6)指纹图谱及技术参数
①指纹图谱根据供试品的检测结果,建立指纹图谱。采用高效液相色谱法和气相色谱法制定的指纹图谱,其指纹图谱的记录时间一般为1小时;采用薄层扫描法制定指纹图谱,必须提供从原点至溶剂前沿的图谱;采用光谱方法制定的指纹图谱,必须按各种光谱的相应规定提供全谱。对于化学成分类型复杂的样品,必要时可建立多张指纹图谱。指纹图谱的建立应根据10批次以上供试品的检测结果所给出的相关参数来制定。②共有指纹峰的标定采用色谱方法制定指纹图谱,必须根据参照物的保留时间计算指纹峰的相对保留时间。根据10批次以上供试品的检测结果,标定生药的共有指纹峰。色谱法采用相对保留时间标定指纹峰,光谱法采用波长或波数标定指纹峰。③共有指纹峰面积的比值以对照品作为参照物的指纹图谱,以参照物峰面积作为1,计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值;以内标物作为参照物的指纹图谱,则以共有指纹峰中其中一个峰(要求峰面积相对较大、较稳定的共有峰)的峰面积作为1,计算其它各共有指纹峰面积的比值。各共有指纹峰的面积比值必须相对固定。生药的供试品图谱中各共有峰面积的比值与指纹图谱各共有峰面积的比值比较,单峰面积占总峰面积大于或等于20%的共有峰,其差值不得大于±20%;单峰面积占总峰面积大于或等于10%,而小于20%的共有峰,其差值不得大于±25%;单峰面积占总峰面积小于10%的共有峰,峰面积比值不作要求,但必须标定相对保留时间。未达基线分离的共有峰,应计算该组峰的总峰面积作为峰面积,同时标定该组各峰的相对保留时间。应根据10批次以上供试品图谱中各共有指纹峰面积的比值,计算平均比值,列出各批供试品的检测数据。④非共有峰面积计算10批次以上供试品图谱中非共有峰总面积及其占总峰面积的百分比,列出各批供试品的检测数据。
(7)指纹图谱的相似性评价
指纹图谱的相似性需要应用高等数学方法建立模型计算,一般采用两种算法,一是相关系数方法,二是夹角余弦法。已经有专家研制出指纹谱相似性评价软件。 生药质量标准中的“检查”部分是指生药中可能掺入的一些杂质以及与生药质量有关的项目,根据品种不同或具体情况,具有不同检查内容,是保证质量的重要项目之一。
有关检查项目常有:
1.杂质
指基源与规定相符,但其性状或部位与规定不符的药材;来源与规定不同的物质;无机杂质如砂石、泥块、尘土等。
2.药用部分比例
为保证生药质量,有的生药需规定药用部位的比例。例如穿心莲中穿心莲叶不得少于35%。
3.灰分
灰分有总灰分及酸不溶性灰分,对测定生药品质,颇为重要。根据生药的具体情况,可规定其中一项或二项。易夹杂泥砂药材或对难以加工处理和炮制也不易除去泥砂的生药,应规定总灰分。同一生药来源不同,其总灰分含量也会相差悬殊。因此需多产地(或多购进地)的产品进行测定后,再订出总灰分限度。不易夹杂泥砂或未经涂抹而产品加工比较光洁的药材,可不规定总灰。
药 表面黄白色,断面白色。褐色:代赭石表面暗棕红色或灰黑色。蓝色:青黛 深蓝色。杂色:五花龙骨 淡灰白色、淡黄白色或淡黄棕色,夹有蓝灰色及红棕色深浅不同的花纹。石膏有绢丝光泽;自然铜金属光泽;大青盐玻璃样光泽;珍珠彩光闪耀;延胡索蜡样光泽;